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ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠稀釋血清的步驟及原因有哪些?
更新時(shí)間:2017-10-10   點(diǎn)擊次數(shù):1105次

ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟:
先把蛋白稀釋一定的倍數(shù),比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確定一個(gè)參數(shù)),將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板,再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌,再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng),經(jīng)孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應(yīng)后分別測定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋?有兩個(gè)原因:
1)競爭抑制比較明顯,應(yīng)稀釋競爭物;
2)血清中含有的性腺激素比較低,應(yīng)該濃縮才對。
血清稀釋用普通的PBS即可,可加1%的BSA,能有效降低ELISA本底,當(dāng)然如果你嫌麻煩我覺得用生理鹽水替代PBS關(guān)系也不大。不管你是用直接競爭還是間接競爭,血清的稀釋倍數(shù)肯定要事先確定,但也不用一點(diǎn)點(diǎn),你做一個(gè)預(yù)試驗(yàn)即可,選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù),即你的競爭ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠中陰性孔OD在1.0,這樣作出來的曲線比較敏感。
250    Kligler Iron Agar    用于細(xì)菌復(fù)合生化試驗(yàn)(葡萄糖,乳糖)    克氏雙糖鐵瓊脂    
250    Blood Agar Base N0.2    供分離營養(yǎng)要求非常高的致病菌用,后加血液制成血平板    血瓊脂基礎(chǔ)2號
250    Blood Agar Base    供分離營養(yǎng)要求較高的致病菌用,后加血液制成血平板    血液瓊脂基礎(chǔ)     
250    Blood Enrichment Medium    用于從血液中分離病原菌    血液增菌培養(yǎng)基    
250    TTC-Sabourand’s Medium    用于分離真菌,酵母菌等    氯化三苯四氮唑-沙保羅培養(yǎng)基  
250    Maconkey Agar    用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)(OXOID方法)    麥康凱瓊脂     
250    Maconkey Agar(without salt)    用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)(OXOID方法)    麥康凱瓊脂(不含鹽)    
250    Maconkey Agar No.2    用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)(OXOID方法)    麥康凱瓊脂2號     
250    Maconkey Agar No.3    用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)(OXOID方法)    麥康凱瓊脂3號     
250    Alkaline Agar    用于分離霍亂弧菌    堿性瓊脂平板    
250    Alkaline Bile Salt Agar    用于分離霍亂弧菌    堿性膽鹽瓊脂    
ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠

 

 

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